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关于多聚甲醛固定的那些事

信息来源:http://whmhwz.com/ 作者:武汉食用葡萄糖厂家 发布时间:2021-04-13 15:34

  武汉多聚甲醛固定,确实是老生长谈,很多研究生在做实验时,可能很多师兄师姐都让他们用多聚甲醛固定,有些可能是为了长时间保存样本,希望集中起来染色,有些可能是染色后排不上队,想保持长时间质量稳定。于是就这么口口相传下来了。


  做科研或临床时,可能很多习惯性都会用4%多聚甲醛预先固定标本,可能出于三个目的:(1)为了灭活标本里面可能存在的微生物(细菌、病毒等),起到保障作用。(2)希望标本能够较长时间存放(3)做胞内染色前的准备。但是,可能很多人忽视了一点,就是如果在染色之前用多聚甲醛固定标本,细胞表面有些位点在固定后构象发生改变,使得抗体无法结合产生假阴性,也可能由于固定作用,导致其它位点产生非特异性结合(假阳性)。


  染色后的固定,就与抗原构象关系不大了,更多的是荧光素。以前4色以内的时候,用的荧光素都是非串联的,因此大多数影响不大,但随着各种新型串联染料的出现,多聚甲醛固定就成了问题了。如果检测的是前述表格中容易被多聚甲醛影响的分子,请尽量不要预固定,如需长期保存样本,可以考虑冻存单个核细胞。如果检测的是前述表格中不会受多聚甲醛影响的分子,可用1%多聚甲醛预固定保存,但FSC、SSC和荧光强度影响较大,如需避免此类缺点,可考虑流式中文网研发的细胞保存液。流式中文网的细胞保存液不含多聚甲醛,具有缓释轻柔的固定作用,故保存更长久,效果更佳,样本:保存液=6:1——10:1,21——28天内检测均可获得良好的检测结果。


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